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來源: 發(fā)布時間:2025-06-09

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1.0視為提取效果良好。土壤類型:有機營養(yǎng)土100mg、花壇土100mg、鹽堿土250mg、沙漠土250mg。提取方法:自動化/手工、自動化/手工、自動化/手工、自動化/手工。DNA收率(ng/mg樣本):130.25+4.95;196.08+3.92、19.92+0.95;24.43+0.74、11.75+0.37;13.43+0.39、2.47+0.13;2.97+0.13。A260/A280:1.84+0.00;1.98+0.02、1.86+0.01;1.85+0.02、1.87+0.02;1.90+0.01、1.85士0.00;1.91+0.03。A260/A230:1.23+0.02;1.08+0.01、1浦東新區(qū)FastDNA Spin Kit For Soil土壤DNA提取一級代理網(wǎng)上訂購土壤DNA提取的官網(wǎng)。

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取100-200 mg土壤樣品,加入樣品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震蕩混勻后,75℃加熱裂解15分鐘;最大轉(zhuǎn)速離心5分鐘,將上清液轉(zhuǎn)移至新的樣品管中,加入800 ul結(jié)合液,混勻;混合液轉(zhuǎn)移至裝有石英膜的離心柱中,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,加入500 ul漂洗液,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,加入500 ul漂洗液,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,12000rpm離心3分鐘,將離心柱轉(zhuǎn)移至新的離心管中,70℃加熱3分鐘;加入20 ul洗脫液,70℃加熱3分鐘;12000rpm離心1分鐘,丟棄離心柱,離心管中液體即為DNA溶液。 2)PCR擴增及電泳 PCR擴增使用Identifiler Plus試劑盒,10 μl擴增體系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,擴增程序為,95℃,11分鐘;

樣本,5-6m/s,研磨20-40s,難裂解樣本研磨2個循環(huán),增加研磨力度,提取按土壤試劑盒提取protocol進行。·較軟的樣本,仍然可以采用介質(zhì)E,提高裂解的劇烈程度,增加研磨速度和時間,增加研磨次數(shù)。不僅如此,我們還有文獻支持。參考文獻1:·樣本類型:葡萄枝·樣本粉碎:使用液氮和攪拌機將植物材料在無菌鋼瓶中粉碎。·樣本裂解:FastPrep-24TM 5G,介質(zhì)E裂解。·樣本DNA提取:FastDNA Spin Kit for Soil提取。·下游實驗:細菌16S rD上海益啟生物家賣的土壤DNA提取包售后嗎?

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加入500 ul漂洗液,混勻,上磁力架吸附1分鐘,吸棄上清;70℃加熱3分鐘;加入20 ul洗脫液,震蕩混勻,70℃加熱3分鐘;上磁力架吸附1分鐘,上清DNA溶液轉(zhuǎn)移至新的離心管中。 2)PCR擴增及電泳 PCR擴增使用Identifiler Plus試劑盒,10 μl擴增體系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,擴增程序為,95℃,11分鐘;94℃,20 秒,59℃,3分鐘,30個循環(huán);60℃,10分鐘;4℃保存;電泳在ABI 3500XL儀器中進行;電泳上樣體系為,1 μl PCR產(chǎn)物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 以上所述*為本發(fā)明的具體實施方式而已,并不用于限制本發(fā)明,對于本領域的技術人員來說,本發(fā)明可以有各種更改和變化;凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)所作的任何修改、等同替換、改進等,均應包含在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。上海益啟生物的聯(lián)系電話。靜安區(qū)土壤DNA提取

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