單光子顯微技術是相對成熟的熒光顯微技術，但由于單光子顯微技術使用的激發光波長較短，成像深度比較有限；能量比較大,會造成對熒光物質的漂白,光毒性嚴重。激光共焦掃描顯微鏡由于共焦顯微鏡的孔徑很小,實現樣本三維成像要逐點掃描,成像速度慢,對樣本損害大,很難用于長時間活細胞成像實驗。而寬場顯微鏡能夠很好地實現實時動態成像,光漂白小,因而較早應用于活細胞內的實時檢測，但寬場顯微鏡由于離焦信號的干擾,難以實現多維成像。清醒動物腦功能鈣成像的微型顯微鏡的研究在不斷實踐中。哈爾濱超微顯微鈣成像聯系方式

轉基因Ca2+指示劑：轉基因技術和光遺傳技術的飛速發展，催生了基因編碼的Ca2+指示劑（GECIs）。它們不依賴于熒光染料，可以靶向特定的組織，如神經細胞、心肌細胞、T細胞等，并且可以避免熒光指示劑帶來的的許多問題，是監測轉基因動物體內鈣離子的一個極好的工具。個基因編碼的鈣離子指示劑Cameleon早在1997年就發表了。它是利用與鈣離子結合后發生結構變化，作為供體的CFP和作為受體的YFP之間產生FRET的原理。2000年，GCaMP誕生了。它是增強型綠色熒光蛋白（EGFP）和鈣調蛋白（結合鈣離子）、鈣調蛋白結合肽M13組成的，結合鈣離子后，鈣調素-M13相互作用引起GFP空間結構變化，發出綠色熒光（圖5）。GCaMP的問世有著**性的意義，它改變了我們觀察神經元群體活動的方式，讓科學家們可以在成千上萬的細胞中，看到哪些神經元在放電，它們放電的模式和規律是怎樣的，從而進一步探索各種內在的神經機制。美國神經細胞鈣成像多少錢鈣成像系統在自由行為動物上對鈣離子動態進行單細胞分辨率級別的持久成像。

雙光子熒光顯微鏡（Two-PhotonLaser-ScanningMicroscopy）。雙光子顯微成像技術是近些年發展起來的結合了共聚焦激光掃描顯微鏡和雙光子激發技術的一種新型非線性光學成像方法,采用長波激發，能對組織進行深層次成像。常用的比較好激發波長大多位于800-900nm，而水、血液和固有組織發色團對這個波段的光吸收率低，此外散射的激發光子不能激發樣品，因此背景第，光損傷小，適用于在體檢測。雙光子熒光成像技術能準確定位細胞內置入的微電極位置，從而觀察胞體、樹突甚至單個樹突棘的活性。研究者可完整的觀察神經組織的gaofen辨熒光圖像,甚至可以分辨神經細胞單個樹突棘中的鈣分布。

鈣成像的熒光指示劑鈣成像的熒光探針一般均為Ca2螯合劑EGTA，APTRA，BAPTA的衍生物，它們可以結合鈣離子從而顯示一個光譜響應，使研究者可以用熒光顯微鏡來觀察細胞內的自由鈣的濃度。熒光顯微鏡可以使用普通的倒置熒光顯微鏡來進行鈣信號的測定和成像。并可結合電生理設備、活細胞培養裝置等，適用于大強度、廣范圍的鈣信號測定。共聚焦顯微系統，共聚焦以激光為光源，且可配備氬離子光源，可以選擇可見光激發的鈣指示劑，進行層掃，相比普通熒光顯微鏡有更好的空間分辨率。并且共聚焦除了配備大視野掃描鏡更可配置共振掃描振鏡，以滿足更高速成像應用的需求。雙光子顯微系統使用長波長來激發熒光指示劑，具有較低的細胞毒性，也可適用于紫外激發的鈣指示劑，且可獲得和單光子共聚焦系統類似的空間分辨率。小結綜上可見，在研究鈣信號時，可結合樣品自身特點來選擇相應的鈣指示劑，并考慮既有的實驗設備，來確定具體的實驗方案。同時還需進一步摸索實驗數據的校正、控制等多種影響因素，可獲得可靠的圖像及熒光定量數據。近年來出現了通過植入性的顯微鏡或透鏡進行活動動物鈣成像的技術。

研究顯示NL189BLA神經元通過投射到CEA來控制探索行為中動物的運動速度和瞬時停滯。隨著進一步的探索，該神經元群體的活性以經驗依賴性的方式增加，而NL189BLA神經元的暫時性功能喪失會導致瞬間停滯的yizhi，而且這些行為停滯與焦慮和恐懼無關。動物在這些停滯點開始和終止探索性旅程并在停滯后會改變頭部朝向和運動軌跡方向，因此在熟悉的位置進行短暫停滯可能是替代性嘗試錯誤行為的決策。這些結果揭示杏仁核作為新穎性/熟悉性檢測器以及行為效應器環路的共同作用，其具有基于探索行為期間的空間經驗來驅動或yizhi自發運動的能力，這對于動物在自然界中安全有效的探索未知環境是十分必要的。傳統鈣成像實驗要求成像的光路極為穩定。寧波熒光鈣成像動物行為學

通過鈣成像技術發現神經元的活動與其內部的鈣離子濃度密切相關。哈爾濱超微顯微鈣成像聯系方式

nVista神經元超微鈣成像系統是可以在自由活動的動物上進行大范圍的動態熒光成像的設備。通過nVist，您可以視覺化細胞活動，同步行為學，以及長期追蹤神經環路的活動。nVista被應用于全球的研究機構中，產生了影響力的大數據庫。主要特征：利用GCamp鈣離子探針進行成像功能完整的數據采集軟件，實現對焦，調焦，行為同步化單細胞分辨率下，可同時捕獲成百上千神經元活動長時間追蹤細胞，追蹤時間可長達數月電子對焦，保證視野范圍的恒定自由動物行為學：可運用標準行為學測量方法，行為操作箱，迷宮，曠場等可進行皮層，深部核團，以及腦干，中腦等區域的成像記錄動物無需進行適應性訓練鈣離子成像+自由活動行為學1.錨定特殊細胞類型，例如特定的receptor/promotor/geneticmarker2.單細胞的空間分辨率，可以分析細胞在空間內的mapping和編碼信息3.動物可在大范圍的曠場內自由活動4.長時程追蹤同一細胞的放電規律變化：用于學習，記憶，藥物成癮等研究。5.可對腦內的深部核團進行記錄nVista神經元超微鈣成像系統成像效果好。神經元超微鈣成像系統技術參數專業的數據采集軟件Inscopix數據采集軟件可記錄成百上千個神經元細胞。電子調焦功能，可通過軟件實現物理調焦。哈爾濱超微顯微鈣成像聯系方式