培養(yǎng)基的實驗室制備:正確制備培養(yǎng)基時微生物檢驗的較基礎步驟之一。使用脫水培養(yǎng)基和其他成分,尤其是含有有毒物質(如膽鹽或其他選擇劑)的成分時,應遵守良好實驗室規(guī)范和生產(chǎn)廠商提供的使用說明。培養(yǎng)基的不正確制備會導致培養(yǎng)基出現(xiàn)質量問題。使用商品化脫水合成培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基時,應嚴格按照廠商提供的使用說明配置。記錄所有相關數(shù)據(jù),如質量/體積、pH、制備日期、滅菌條件和制備人員等。使用各別成分制備培養(yǎng)基時,應按照配方準確配制,記錄所有細節(jié)信息,如;培養(yǎng)基名稱和類型及試劑級別、每個成分物質含量、制造商、批號、pH、培養(yǎng)基體積(分裝體積)、無菌措施(包括實施的方式、溫度及時間)、配置日期、人員等,以便潮源。緊急停止鍵卡滯可用酒精清潔觸點。山東瓊脂培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基制備的基本方法和注意事項:1.培養(yǎng)塞pH的初步調整培養(yǎng)基各成分完全溶解后,應進行pH的初步調正,因培養(yǎng)基在加熱消毒過程中、pH會有所變化,例如,牛肉浸液約可降低pH0.2.而腸浸液pH卻會有明顯的升高。因此,對這個步驟,操作者應隨時注意探索經(jīng)驗、以期能掌握培養(yǎng)基的較終pH,保證培養(yǎng)基的質量。pH調正后,還應將培養(yǎng)基煮沸數(shù)分鐘,以利培養(yǎng)基沉淀物的析出。2.培養(yǎng)基的過濾澄清液體培養(yǎng)基必須澄清,瓊脂培養(yǎng)基也應透明無明顯沉淀,因此,須要采用過濾或其它澄清方法以達到此項要求。一般液體培養(yǎng)基可用濾紙過濾法,濾紙應拆疊成折扇成漏斗形,以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。內(nèi)蒙古培養(yǎng)基制備器自動排汽功能減少氣泡生成,提升培養(yǎng)基均質度。
培養(yǎng)基在使用前通過高壓或過濾滅菌。防止污染應該注意以下事項:確認工作細胞庫是否被污染,確認毒種工作種子批是否被污染,確認所用培養(yǎng)基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染,均可用細菌、及支原體無菌試驗來確認并排除。同時要對無菌試驗培養(yǎng)基的靈敏度進行驗證。實際生產(chǎn)中,可以從配制好的培養(yǎng)液中取少量加入營養(yǎng)瓊脂于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),48小時即可觀察有無污染。其它:高壓滅菌設備、過濾除菌設備均應進行驗證,確保滅菌和除菌效果;前者應在投產(chǎn)前及其后的每6個月進行驗證,后者應在每次除菌前、后進行驗證工作(至少應在除菌后進行一次)。另外,應將有毒區(qū)與無毒區(qū)嚴格分開,并有各自獨自的空氣凈化系統(tǒng)及孵室,有毒區(qū)對無毒區(qū)應保持相對負壓,防止病毒對培養(yǎng)細胞(尤其是細胞庫)的污染。
天然培養(yǎng)基是指一類利用動物、植物或微生物體包括其提取物制成的培養(yǎng)基。例如。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、麥芽汁培養(yǎng)基和LB培養(yǎng)基等。常用的天然有機營養(yǎng)物質包括豆芽汁、玉米粉、土壤浸液、麩皮、牛奶、血清、椰子汁等。天然培養(yǎng)基成本較低,除在實驗室經(jīng)常使用外,也適于用來進行工業(yè)上大規(guī)模的微生物發(fā)酵生產(chǎn)。組合培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基是根據(jù)天然培養(yǎng)基的成分,用化學物質模擬合成、人工設計而配制的培養(yǎng)基。例如,高氏1號培養(yǎng)基和查氏培養(yǎng)基等。合成培養(yǎng)基有一定的配方,配制合成培養(yǎng)基時重復性強,但與天然培養(yǎng)基相比其成本較高,微生物在其中生長速度較慢,一般適于在實驗室用來進行有關微生物營養(yǎng)需求、代謝、分類鑒定、生物量測定、菌種選育及遺傳分析等方面的研究工作。半組合培養(yǎng)基指一類主要以化學試劑配制,同時還加有某種或某些天然成分的培養(yǎng)基。程序化滅菌曲線優(yōu)化能量利用,減少資源浪費。 整合攪拌系統(tǒng)確保瓊脂等膠體物質均勻分布。
培養(yǎng)基:是指供給微生物、植物或動物(或組織)生長繁殖的,由不同營養(yǎng)物質組合配制而成的營養(yǎng)基質。一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽(包括微量元素)、維生素和水等幾大類物質。培養(yǎng)基既是提供細胞營養(yǎng)和促使細胞增殖的基礎物質,也是細胞生長和繁殖的生存環(huán)境。培養(yǎng)基的種類:培養(yǎng)基種類很多,根據(jù)配制原料的來源可分為自然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基;根據(jù)物理狀態(tài)可分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基;根據(jù)培養(yǎng)功能可分為基礎培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、加富培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基等;根據(jù)使用范圍可分為細菌培養(yǎng)基、放線菌培養(yǎng)基、酵母菌培養(yǎng)基、菌培養(yǎng)基等。投資一臺高性能制備器可明顯降低實驗失敗率,長期節(jié)省時間和成本。內(nèi)蒙古培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基制備器鋁制表面光滑平坦;易于清潔,無孔隙和裂縫,以防培養(yǎng)基流進去.山東瓊脂培養(yǎng)基制備器
培養(yǎng)基的制備原則和要求:培養(yǎng)基是根據(jù)各類微生物生長繁殖的需要,用人工方法把多種物質混合而成的營養(yǎng)物。一般用來分離、培養(yǎng)菌類。常用的培養(yǎng)基有基礎培養(yǎng)基、增菌培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基和厭氧培養(yǎng)基。在制備培養(yǎng)基時,應掌握如下原則和要求:(一)培養(yǎng)基必須含有細菌生長繁殖所需要的營養(yǎng)物質。所用的化學藥品必須純凈,稱取的份量務必準確。(二)培養(yǎng)基的酸堿度應符合細菌生長要求。按各種培養(yǎng)基要求準確測定調節(jié)pH值。多數(shù)細菌生長的適宜pH值為7.2~7.6,呈弱堿性。山東瓊脂培養(yǎng)基制備器