Alanyl-glutamine,Ala-Glu),又名丙氨酰谷氨酰胺、丙谷二肽,是一種高級細胞培養添加劑,可直接替代細胞培養基中的L-谷氨酰胺。L-谷氨酰胺(Glutamine)是細胞培養中所必需的一種營養素,但其在溶液中不穩定,會自發降解生成氨和焦谷氨酸,其中氨對細胞有害;而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分的穩定,不會自發的降解。細胞利用其機制是:在細胞培養時,細胞會逐漸向培養液中釋放一種肽酶,將L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺,而后細胞會將這兩種水解產物吸收利用。細胞利用L-丙氨酰-L-谷氨酰的過程與流加培養策略相似,連續的將低濃度水平的L-谷氨酰胺加入到培養液中,從而提高了L-谷氨酰胺的利用率,且不會生成多余的氨,更利于細胞的生長。L-丙氨酰-L-谷氨酰可以代替等摩爾的L-谷氨酰胺,適用于所有的細胞,幾乎無需適應,并且可以延長細胞的培養時間,減少傳代次數,即節省了時間也節約了金錢。與添加L-谷氨酰胺的培養基中培養的細胞相比,活性降低得更慢。延滯期略微延長的原因是肽酶的釋放和二肽的消化需要一定的時間。NEAA(非必須氨基酸),是在MEM培養基的基礎上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天(門)冬酰胺、L-天。William’s E培養基主要用于大鼠肝上皮細胞的長期培養,也可用于其他哺乳動物的肝細胞培養。江西細胞培養基廠家直銷
MEMα是一種改良的MEM培養基,與MEM培養基相比MEMα培養基營養更為豐富,在MEM的基礎上又添加了NEAA、**酸鈉、硫酸鋅、VB12、生物素、抗壞血酸等成分,廣泛應用于各種哺乳動物懸浮和貼壁細胞的培養。不含核苷和脫氧核苷的MEMα培養基常常用作DG44和其他DHFR-缺陷型細胞的篩選培養基。酚紅在培養基中被用來作為PH值的指示劑,用以持續監測培養液的酸堿度,在低PH值時酚紅使培養液呈黃色,而較高的PH值時使培養液呈紫色,PH值~,**適合細胞培養。但酚紅也有一些缺點,研究表明酚紅可以模擬固醇類***(特別是雌***)的作用,因此在用到雌***敏感的細胞時(如乳腺組織),比較好使用不含酚紅的培養基。酚紅會干擾流式細胞分析時候的檢測。此外,一些無血清培養基的配方中若存在酚紅會干擾鈉-鉀平衡。青霉素-鏈霉素混合液通常也被稱為“雙抗”,是體外培養中為預防微生物污染**常用的***,其中,青霉素能夠干擾細菌細胞壁的合成,對革蘭陽性菌特別有效;而鏈霉素能夠與細菌核糖體30S亞單位結合,抑制細菌蛋白質的合成,對革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌均有效,但對革蘭氏陰性菌特別有效。青霉素和鏈霉素聯合使用可以預防絕大部分的細菌污染。 江西正規細胞培養基供應商家Fischer’s培養基不含蛋白質、脂類或任何生長因子,故此產品需搭配血清或無血清添加物使用。
L-谷氨酰胺(Glutamine)是細胞培養中所必需的一種營養素,但其在溶液中不穩定,會自發降解生成氨和焦谷氨酸,其中氨對細胞有害;而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分的穩定,不會自發的降解。細胞利用其機制是:在細胞培養時,細胞會逐漸向培養液中釋放一種肽酶,將L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺,而后細胞會將這兩種水解產物吸收利用。細胞利用L-丙氨酰-L-谷氨酰的過程與流加培養策略相似,連續的將低濃度水平的L-谷氨酰胺加入到培養液中,從而提高了L-谷氨酰胺的利用率,且不會生成多余的氨,更利于細胞的生長。L-丙氨酰-L-谷氨酰可以代替等摩爾的L-谷氨酰胺,適用于所有的細胞,幾乎無需適應,并且可以延長細胞的培養時間,減少傳代次數,即節省了時間也節約了金錢。與添加L-谷氨酰胺的培養基中培養的細胞相比,活性降低得更慢。延滯期略微延長的原因是肽酶的釋放和二肽的消化需要一定的時間。NEAA(非必須氨基酸),是在MEM培養基的基礎上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天(門)冬酰胺、L-天(門)冬氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA,能降低細胞培養時細胞自身生產非必須氨基酸的副作用,有效促進細胞增殖代謝。葡萄糖可以根據研究需要。
1.細胞培養基的種類按照細胞培養基的發展歷史,細胞培養基大致可分為平衡鹽溶液、天然細胞培養基、合成細胞培養基、無血清細胞培養基、限定化學成分細胞培養基等幾大種類。(balancedsaltsolution,BSS)BSS主要是由無機鹽、葡萄糖組成,它的作用是維持細胞滲透壓平衡,保持pH穩定及提供簡單的營養。其主要用于細胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下(表1-1)。D-Hank's與Hank's的一個主要區別是前者不含有Ca2+和Mg2+,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因為Ca2+、Mg2+是細胞膜的重要組成成份,參與細胞粘附等功能,使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免細胞結團。此外,Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎溶液,前者緩沖能力較弱,適合于密閉培養;后者緩沖能力較強,適合于5%CO2的培養條件。天然培養基指來自動物體液或利用組織分離提取的一類培養基,如血漿、血清、雞胚浸出液等。其優點是營養成分豐富,培養效果良好,但缺點是成分復雜,來源受限且制作過程復雜、批間差異大。目前使用的天然培養基是血清,另外各種組織提取液、促進細胞貼壁的膠原類物質在培養某些特殊細胞也是必不可少。水解乳蛋白是乳白蛋白經蛋白酶和肽酶水解的產物。HeLa 細胞、Jurkat 細胞、 MCF-7 細胞、PC12 細胞、PBMC 細胞、星形膠質細胞和ai細胞,是使用的培養基之一。
Leibovitz’sL-15培養基的緩沖系統由磷酸鹽和游離堿基氨基酸組成,代替了傳統的碳酸氫鈉緩沖系統,同時,用半乳糖和**酸鈉代替葡萄糖可以防止酸性代謝副產物的形成,有助于維持培養液PH的穩定,適合用于非CO2平衡環境的細胞培養。Leibovitz’sL-15培養基適用于猴腎細胞和HEP-2的培養、原代(如胚胎和成人組織)細胞分離、多種病毒的培養以及神經元的培養等。青霉素-鏈霉素混合液通常也被稱為“雙抗”,是體外培養中為預防微生物污染常用的***,其中,青霉素能夠干擾細菌細胞壁的合成,對革蘭陽性菌特別有效;而鏈霉素能夠與細菌核糖體30S亞單位結合,抑制細菌蛋白質的合成,對革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌均有效,但對革蘭氏陰性菌特別有效。青霉素和鏈霉素聯合使用可以預防絕大部分的細菌污染。本產品含有多類細胞培養所需的氨基酸、維生素、無機鹽等多種成分,但不含蛋白質、脂類或任何生長因子,故此產品需搭配血清或無血清添加物使用。 Dulbecco’s 改良培養基與MEM培養基相比,氨基酸的含量增加了2倍,維生素的含量增加了4倍。遼寧華晨陽細胞培養基全國發貨
Fischer’s培養基含有多類細胞培養所需的氨基酸、維生素、無機鹽等多種成分。江西細胞培養基廠家直銷
在細胞培養實驗里,DMEM 培養基的使用過程需嚴謹規范。收到培養基后,應及時存放于 2-8°C 的環境中,低溫可有效減緩培養基內成分的降解速度,確保其營養成分的穩定性。在使用前,需將培養基預熱至 37°C,模擬人體體溫環境,讓細胞在適宜溫度下開啟生長旅程。同時,由于 DMEM 培養基多采用碳酸氫鈉緩沖系統,需將培養環境的 CO?濃度維持在 5 - 10%,以此精細調控培養基的 pH 值處于 7.2 - 7.4 的生理適宜區間,為細胞打造穩定且舒適的 “居住空間”,促進細胞健康生長。江西細胞培養基廠家直銷
深圳市華晨陽科技有限公司是一家致力于核酸檢測、分子診斷、醫學檢驗、病毒檢測等產品研發、生產、銷售于一體的國家高新技術企業。公司擁有二十多項**,部分專利已經轉化應用于市場。產品主要應用于基因檢測、醫療機構、生物制藥、大型甲等醫院、出入境檢驗檢疫、診斷試劑、疾控機構、刑偵法醫鑒定等。近年來,公司不斷加大自主研發投入,積極引進人才和技術,并與國內外多家科研機構、醫學檢驗所以及三甲醫院、基因檢測公司、疾病預防控制中心等科研機構有著緊密合作,促進人類健康產業大發展。