無血清細胞凍存液:采用patent的凍存配方,用包括重組人血白蛋白等多種蛋白組分替代了血清的用途。用包括DMSO在內的復合凍存保護劑替代了單一的DMSO的保護作用。復合保護劑的內部保護劑,易于穿透細胞膜,避免在細胞凍存過程中細胞內部的水分子形成冰晶損傷細胞;外部保護劑,可在溶液形成冰晶之前,在細胞膜外部競爭性的結合細胞膜表面的水分子,從而降低細胞外溶液的電解質濃度,減少陽離子進入細胞的數量。在細胞內部與外部的協同保護作用下,明顯降低了溫度迅速下降與溫度上升對細胞的損害,因此大幅度提高了細胞經過凍存后的復蘇存活率。同時另一些保護劑不能穿透細胞。石家莊正規無血清細胞凍存液供應商
細胞凍存:取出凍存管,注明細胞名稱,代數,日期。離心后,以無菌吸管吸棄上清,不要吸到底部的細胞沉淀。將細胞沉淀與凍存液充分混勻,根據計數結果,將細胞總數調節成細胞數量為5-10*105/ml為宜。將細胞凍存懸液分裝進細胞凍存管中,一般2ml的凍存管中裝入1-1.5ml凍存液為宜。嚴密封口后,使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低1℃。或者,將裝有細胞的凍存管放入異丙的醇凍存盒中,然后將凍存盒置于–80℃條件下過夜。若無凍存盒及其他凍存裝置,可以先將凍存管置于4℃30min,再-20℃凍存1h直至完全冷凍,再轉移至-80℃冰箱過夜。第二天將已經冷凍的細胞轉移到液氮容器中,置于液氮上方的氣相空間中儲存。無血清細胞凍存液生產廠家無血清細胞凍存液產品性能:2-8℃即可穩定保存,無需冷凍,即取即用。
含血清細胞凍存液凍存細胞時遇到的問題:1.凍存細胞時需現配凍存液(如購買市面上通用的含血清細胞凍存液,此步可省略)。2.需要程序降溫(4℃→-20℃→-80℃→液氮),步驟繁瑣,耗時耗力。3.含血清,細胞污染(細菌、霉菌和支原體等)的風險更高。4.血清批次、品質間差異導致凍存液的批次間差異。5.需液氮凍存,且不能原位(如孔板)凍存。Cellregen無血清細胞凍存液是不含血清和動物源成分,含DMSO、糖類、氨基酸等成分的一款通用型細胞凍存液。Cellregen無血清細胞凍存液的凍存方法是:將細胞凍存懸液(凍存管或孔板)直接放置-80℃冰箱長期保存。
細胞凍存是將細胞放在低溫環境,減少細胞代謝,以便長期儲存的一種技術。細胞凍存是細胞保存的主要方法之一,起到了細胞保種的作用。細胞凍存是細胞保存的主要方法之一,利用凍存技術可以使細胞暫時脫離生長狀態而將其細胞特性保存起來,這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。目前現有技術中,細胞凍存液中的主要成分有10%二甲基亞砜(DMSO)、20%~90%胎牛血清(FBS)、剩余組分為完全培養基。培養基以及FBS可為細胞提供必要的營養物質。DMSO是一種滲透性保護劑,能夠降低細胞冰點,減少冰晶的形成,從而達到降低細胞損傷的保護效果。但FBS屬于動物源性物質,成分比較復雜,在臨床應用上存在潛在的風險,也增加了污染的幾率,并且由于凍存液中含有動物血清,會導致凍存液的成分存在不穩定的因素。無血清細胞凍存液的優勢:因不含血清,批次間差異小。
細胞凍存秘籍:1.在倒置相差顯微鏡上每隔幾分鐘檢查酶處理的進展情況。一旦細胞變圓,輕輕敲擊細胞瓶使其脫離塑料表面。加入5mL含血清的生長培養基滅活胰酶。可能需要劇烈的移液操作來使培養容器底部的剩余細胞脫落,或將細胞團塊分解成單細胞懸浮液。胰酶的去除或失活對于冷凍細胞至關重要。如果游離試劑不能直接滅活,可以通過下一步的離心去除。2.用15ml離心管收集細胞。取出樣本進行細胞計數,剩余的細胞懸液以約100×g離心5分鐘以獲得細胞沉淀。離心時,用細胞計數板對細胞進行計數。使用臺盼藍染液檢查細胞的活性。凍存液中使用的所有原料均應符合臨床或藥物需求。珠海正規無血清細胞凍存液廠家
無血清凍存液使用方法:將加有凍存液的細胞懸液分裝至凍存管中。石家莊正規無血清細胞凍存液供應商
所含化學成分明確,無動物源性成分,可一步實現細胞凍存并長期在-80℃冰箱保存,保護細胞免受冰晶和溶質損傷,適用于大多數常規細胞。LiveCyteTM(LC-1602)是原代細胞及干細胞**凍存液,可進一步提高原代細胞和干細胞凍存效率。產品優點1、省去繁瑣的降溫步驟,可直接放置于-80°C冰箱,節省時間和精力。2、即用型,無需現配,操作方便,可減少實驗中因操作引起的污染。3、在多種哺乳細胞系中經過性能驗證,其復蘇率和活率達90%以上。石家莊正規無血清細胞凍存液供應商